分子诊断所应用到的分子生物学技术主要包括，聚合链式反应（PCR），荧光定量PCR（qPCR），DNA测序（DNA Sequencing），荧光原位杂交（FISH），DNA印记技术（DNA Blotting），单核酸多态性（SNP）和基因芯片（Gene Chip）等技术。这些技术的操作都离不开一个重要的物质 – 核酸（DNA和RNA）。

在动物疫病检测中要处理大量的不同来源的核酸以及核酸本身难以降解的特性，核酸污染是困扰绝大多实验室的一个难题。微量的核酸污染会产生假阳性的检测结果，这样会对疫情造成误诊。如任由此情况发展，会形成气溶胶污染而扩散，终导致整个实验室的污染，严重的会关闭实验室，如无备用实验室，会造成更大的损失。

气溶胶污染是核酸检测过程中最主要且最常见污染，也是困扰绝大多数实验室的一个难题。核酸气溶胶与PCR过程相伴相生。空气与液体面摩擦，离心机离心，剧烈地摇动反应管，PCR开盖，吸样时及移液器的反复吸样，污染物的外泄等途径，都会产生核酸气溶胶。

合理搭建实验室分区布局，可以在空间上避免核酸气溶胶污染。爱基因微流控芯片快速检测系统实验室一般由三个部分组成：试剂储存区（一区）、样本处理区（二区）、扩增检测区（三区），各区在空间上完全独立，不能相通。

各区有独立的通风系统，一、二、三区压力依次递减，一区、二区保持正压，三区保持负压状态，各区间压差≥5 Pa，二区、三区可适当加大压差。 进风口和出风口不能设在建筑的同一平面，要避免排出的空气被重新吸进实验室。 各区域只用于特定的操作，工作衣和清洁消毒物品不得跨区混用，实验室人员和物品应按照从一区→二区→三区的单向工作流向制度，不得逆向流动。

实验室三个区域内的环境、仪器设备等设定为 13 个监测点：试剂准备间实验台、超净工作台、微量移液枪、冰箱，标本处理间实验台、生物安全柜、微量移液枪、离心机、冰箱，扩增间实验台和微流控芯片检测仪。每个台面或仪器设备为一个独立的监测点位，不得相互交叉。

实验人员一定要不断改进并严格遵循实验室操作流程。

1 实验前的准备

1.1 实验前检查相应设备。

1.2 准备好专用工作服，实验室里要准备好一次性口罩、无菌手套、带有滤芯的专用吸头、含有 84 消毒液的废液杯和废液桶、纸巾等。

1.3 进行检验试验前 30 分钟，实验室的墙面、地面用浸泡了 84 消毒液的抹布或拖布擦拭清洁，实验室的台面用 75%的酒精擦拭清洁。

1.4 进行检验试验前30分钟，开启生物安全柜紫外灯照射。

2 实验过程

2.1 操作前穿戴一次性口罩、手套，专用工作服。手套和生物安全柜内喷洒84消毒液。

2.2 绝对避免吸完阳性对照的吸头经过打开的吸头盒。

2.3 最先加阴性对照，并盖上盖子，然后加待检核酸最后加阳性对照，必要时设置试验后阴性对照以验证实验操作假阳性。

2.4 整个操作过程都要戴手套进行，一旦发现有污染风险必须更换手套并喷洒84 消毒液。

2.5 操作过程中的废吸头、废弃物品、被污染物品集中装于带有 84 消毒液的废液缸内，且物品要浸泡于液体中。

3 试验结束后的处理

3.1 实验结束后先用 75%酒精对实验室空气进行密集喷淋,以对实验过程中产生的气溶胶产生较好的沉降效果。喷淋结束立即采用 84 消毒液液擦拭工作台面地面,作用 10 min 后用清水擦拭工作台面,以防止 84 消毒液残留抑制实验结果;设备表面用一次性洁净纱布沾取 75%酒精擦拭消毒。擦拭消毒结束工作人员离开实验室,打开实验室各处的紫外灯和紫外灯车对实验室空气和台面照射消毒,照射时间≥1h。 注：设备擦拭时务必将检测孔遮住。

3.2 生物安全柜操作结束后进行全面擦拭，不得遗漏每个角落，通风运行10分钟以抽出污染气溶胶，然后柜内开启紫外灯照射 30 分钟，每次实验结束清洁一次。

3.3 将所有用 84 消毒液处理过的废吸头、废弃物品等集中装于密封塑料袋内密封，外表喷洒 84 消毒液，传出实验室。实验室外将废物和废液分别处理。专用工作服不得随便穿出实验室，且每周将工作服浸泡 84 消毒液并清洗一次。

3.4 对容易造成污染的工作面进行定期监控，建议1次/月.如门把手、离心机摆放台面、离心机开盖处、样本处理区试剂、试剂操作工作台。

核酸检测实验室防污染措施可结合实验过程中的具体操作方法以达到最佳效果，措施包括但不仅限于上面几种。 细节决定成败，任何一个环节做不好都可能影响整个实验结果。 因此，操作人员应具有“无核酸”“无基因”概念。